PCR實(shí)驗(yàn)室有哪些分區(qū)？PCR實(shí)驗(yàn)室的各個(gè)分區(qū)的功能是什么？PCR實(shí)驗(yàn)室原則上分成四個(gè)區(qū)：試劑準(zhǔn)備區(qū)、樣品制備區(qū)、擴(kuò)增區(qū)、擴(kuò)增產(chǎn)物分析區(qū)。每個(gè)獨(dú)立實(shí)驗(yàn)區(qū)設(shè)置有緩沖區(qū)，同時(shí)各區(qū)通過(guò)氣壓調(diào)節(jié)，使整個(gè)PCR實(shí)驗(yàn)過(guò)程中試劑和標(biāo)本免受氣溶膠的污染并降低擴(kuò)增產(chǎn)物對(duì)人員和環(huán)境的污染。

一、PCR實(shí)驗(yàn)室的四個(gè)分區(qū)

1、試劑準(zhǔn)備區(qū)。此區(qū)主要是進(jìn)行試劑的制備，分裝和主反應(yīng)混合液的制備。試劑盒用于樣品制作的材料應(yīng)直接運(yùn)送至該區(qū)域。試劑原材料必須貯存在本區(qū)內(nèi)，并在本區(qū)內(nèi)制備成所需的試劑。試劑準(zhǔn)備區(qū)主要設(shè)備有天平、冰箱、離心機(jī)、加樣器、振蕩器等。對(duì)于，試劑準(zhǔn)備區(qū)對(duì)氣流壓力的控制并沒(méi)有嚴(yán)格要求，通常在+10Pa。

2、樣品制備區(qū)。此區(qū)主要進(jìn)行樣品的保存，核酸提取，貯存及期入至擴(kuò)增反應(yīng)管和測(cè)定DNA的合成。樣品制備區(qū)主要設(shè)備有冰箱、生物安全柜、離心機(jī)、加樣器、振蕩器等。樣品制備區(qū)的壓力梯度要求為：相對(duì)于鄰近區(qū)域?yàn)檎龎海员苊鈴泥徑鼌^(qū)進(jìn)入本區(qū)的氣溶膠污染， 一般為+10Pa。

3、擴(kuò)增區(qū)。此區(qū)主要進(jìn)行DNA的擴(kuò)增。另外，已制備的DNA模板的加入和主反應(yīng)混合液(來(lái)自試劑準(zhǔn)備區(qū))制備成反應(yīng)混合液等也可在本區(qū)內(nèi)進(jìn)行。擴(kuò)增區(qū)主要設(shè)備有：擴(kuò)增儀、冰箱、離心機(jī)、加樣器等。擴(kuò)增區(qū)的壓力梯度要求為：相對(duì)于鄰近區(qū)域?yàn)樨?fù)壓，為避免氣溶從本區(qū)漏出，一般為-25Pa。

4、擴(kuò)增產(chǎn)物分析區(qū)。此區(qū)主要進(jìn)行擴(kuò)增產(chǎn)物的測(cè)定。擴(kuò)增產(chǎn)物分析區(qū)主要設(shè)備有酶標(biāo)儀、洗板機(jī)、加樣器和水浴箱等。擴(kuò)增產(chǎn)物分析區(qū)的壓力梯度的要求為：相對(duì)于鄰近區(qū)域?yàn)樨?fù)壓，一般為-25Pa，以避免擴(kuò)增產(chǎn)物從本區(qū)擴(kuò)散至其它區(qū)域。

二、PCR實(shí)驗(yàn)室防護(hù)消毒

1、實(shí)驗(yàn)室空氣消毒：實(shí)驗(yàn)室每次檢測(cè)完畢后，需要進(jìn)行空間消毒，清除實(shí)驗(yàn)室殘留的核酸。

2、工作臺(tái)面消毒：每天實(shí)驗(yàn)后使用消毒液進(jìn)行臺(tái)面、地面消毒。包括垃圾桶及垃圾袋都需要噴灑專用消毒液，確保病毒被殺滅。

3、安全柜消毒：每天實(shí)驗(yàn)完成后，對(duì)生物安全柜進(jìn)行擦拭消毒。

4、轉(zhuǎn)運(yùn)容器消毒：轉(zhuǎn)運(yùn)及存放標(biāo)本的容器，使用前后用消毒劑噴灑消毒。

5、塑料或有機(jī)玻璃材質(zhì)消毒：使用過(guò)氧乙酸或過(guò)氧化氫噴霧(噴淋)消毒，或擦拭消毒。

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